Применения колонок в жидкостной хроматографии
Аналитические колонки для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) предназначены для выполнения ключевой задачи — физического разделения сложных смесей на индивидуальные компоненты. Они широко применяются в фармацевтическом анализе, контроле качества пищевых продуктов, экологическом мониторинге и клинической диагностике. Колонка представляет собой стальную трубку, заполненную сорбентом (неподвижной фазой). Параметры колонки: химическая природа и размер частиц сорбента, длина и внутренний диаметр напрямую определяют на разрешение, скорость и эффективность разделения.
Процесс разделения основан на различии в силе взаимодействия компонентов анализируемой пробы с неподвижной фазой, находящейся внутри колонки. При введении пробы в поток подвижной фазы (элюента) различные вещества распределяются между двумя этими фазами. Компоненты, слабее удерживаемые неподвижной фазой, быстрее вымываются элюентом и первыми выходят (элюируются) из колонки. Более сильно взаимодействующие компоненты задерживаются дольше, что приводит к их пространственному и временному разделению.
Преимущества использования хроматографических колонок для ВЭЖХ
- Высокая эффективность. Современные колонки с частицами сорбента в несколько микрометров, обеспечивают исключительно высокую эффективность (большое число теоретических тарелок), что позволяет разделять даже очень близкие по свойствам соединения.
- Стабильность результатов. ВЭЖХ колонки обеспечивают повторяемость времени удерживания и площадей пиков от анализа к анализу и изо дня в день.
- Совместимость с различными системами. Стандартизированные размеры, соединительные элемента и материалы (нержавеющая сталь, PEEK) обеспечивают совместимость колонок от разных производителей с большинством хроматографических систем.
Виды колонок для жидкостной хроматографии
- Обращенно-фазовые (Reversed-Phase, RP). Самый распространенный тип колонок. Неполярная стационарная фаза (чаще всего модифицированный силикагель, например, C18, C8) и полярная подвижная фаза (вода, ацетонитрил, метанол).
- Нормально-фазовые (Normal-Phase, NP). Полярная стационарная фаза (силикагель, аминогруппы, цианогруппы) и неполярная подвижная фаза (гексан, хлористые метилены). Применение: анализ изомеров, жирорастворимых витаминов, некоторых классов липидов и пестицидов.
- Ионообменные колонки (Ion-Exchange). Разделение основано на ионном заряде аналитов. Стационарная фаза содержит заряженные функциональные группы. Применение: очистка воды, анализ пищевых продуктов, протеомика, исследование биомолекул.
- Колонки для эксклюзионной хроматографии. Разделение происходит по молекулярной массе. Стационарная фаза содержит поры определенного размера. Применение: определение молекулярно-массового распределения полимеров, анализ белковых агрегатов, очистка биомолекул.
- Гидрофильные HILIC-колонки. Гибридный механизм. Полярная (гидрофильная) стационарная фаза и подвижная фаза с высоким содержанием органического растворителя (ацетонитрила). Применение: анализ сахаров, аминокислот, пептидов, метаболомика, фармацевтические примеси.
- Ионного исключения (ICE), Ионно-эксклюзионные колонки. Разделение основано на различии в степени диссоциации. Сильноионизированные молекулы отталкиваются от заряженной матрицы (например, сульфонированной смолы) и элюируются быстро, а слабоионизированные или нейтральные — задерживаются. Применение: пищевая промышленность, контроль брожения, анализ органических кислот в напитках и биологических жидкостях.
Критерии выбора колонок для ВЭЖХ
Тип фазы: определяет механизм разделения (обращенно-фазовая, ионообменная, HILIC и др.) в зависимости от природы аналитов.
Размер частиц: меньшие частицы (1.7–3 мкм) обеспечивают более высокую эффективность разделения, но требуют более высокого давления. В основном используются частицы 5 мкм.
Длина колонки: увеличение длины улучшает разделение, но повышает давление и время анализа.
Стандартный размер колонки: 50–250 мм. Диаметр колонки: влияет на чувствительность и расход элюента. Аналитические колонки (2.1–4.6 мм) подходят для большинства задач.
Купить ВЭЖХ колонки от компании «ЭЛЕМЕНТ»
Оставьте заявку на нашем сайте через форму обратной связи, отправьте запрос на электронную почту: info@element-msc.ru или позвоните нам прямо сейчас по бесплатному номеру 8 (800) 250-34-64, чтобы получить коммерческое предложение и профессиональную консультацию.
